Распределительная хроматография на бумаге

Распределительная хроматография на бумаге

• Распределительная хроматография на бумаге В дополнение к обычным носителям, используемым для упаковки колонки, некоторые носители используются в разделительной хроматографии для полного удаления колонки. Такой носитель представляет собой специальную хроматографическую бумагу, а технология, основанная на его использовании, называется проточной хроматографией на бумажной или проточной бумажной хроматографии.

• Во многих отношениях он похож на тонкослойную хроматографию (ТСХ). Х — смещение фронта растворителя. Метод определения R \ в бумажной хроматографии такой же, как соответствующий метод в ТСХ, основанный на измерениях в соответствии с рисунком 1. 17,8. Сначала хроматографический образец наносится на первую (начальную) линию листа бумаги и подвергается действию подвижной фазы (растворителя).

Важной характеристикой распределительной хроматографии на бумаге и ТСХ является Rf = x / xf. Где х — сдвиг зоны компонента. Людмила Фирмаль

Если компонент окрашен, через некоторое время вы можете увидеть отдельные цветные пятна на хроматограмме. Первый компонент имеет Rfl = x \ / Xft, второй компонент имеет Rf2 = x2 / x {и так далее. В идеальных условиях коэффициент Rf определяется исключительно свойствами материала, параметрами бумаги и свойствами растворителя, но не зависит от концентрации материала или наличия других компонентов.

Фактически было установлено, что коэффициент Rf в некоторой степени зависит от этих факторов и экспериментальных методов. Тем не менее, если условия эксперимента являются достаточно постоянными и изменение состава смеси не слишком велико, эти факторы остаются очень постоянными и могут использоваться для идентификации компонентов смеси.

Хроматографическая бумага должна быть химически чистой, нейтральной, инертной к компонентам раствора и движущимся растворителям и однородной по плотности. Свойства молекул целлюлозы в бумаге, такие как структура, набухание, ориентация волокон Это влияет на скорость движения растворителя и другие свойства процесса.

Советский Союз производит четыре сорта специальной бумаги для хроматографии с разными номерами (№ 1, № 2 и т. Д.). В атмосфере пара бумага поглощает значительное количество влаги (до 20-25% своей массы), поэтому, если стационарная жидкая фаза — вода, дополнительного увлажнения бумаги не произойдет.

• Когда в качестве стационарных фаз выбрано несколько органических веществ, гидрофильная бумага становится гидрофобной и погружается в раствор различных гидрофобных веществ (парафин, растительное масло и т. Д.). Для выбранного растворителя компоненты образца должны иметь различную растворимость. В противном случае никакого разделения не произойдет.

В растворителях с подвижной фазой растворимость каждого компонента должна быть ниже, чем в растворителях с неподвижной фазой, но это все еще весьма заметно. Это ограничение связано с тем, что если вещество обладает очень высокой растворимостью, вещество перемещается вдоль фронта растворителя.

Если растворимость очень низкая, вещество остается в первом ряду. Людмила Фирмаль

При разделении водорастворимых веществ органические растворители обычно используются в качестве подвижной фазы, а вода — в качестве стационарной фазы. Если вещество растворимо в органическом растворителе, вода уже используется в качестве подвижной фазы, а органический растворитель является стационарной фазой. Это так называемый метод обратной фазы.

Как правило, к растворителям предъявляются следующие требования: не смешивать растворители для подвижной и стационарной фаз. Не меняйте состав растворителя во время хроматографии. Растворители должны быть легко удалены с бумаги. Отдельные растворители для разделительной хроматографии встречаются относительно редко.

Чаще всего для этой цели используют смесь веществ, например смесь бутилового спирта и уксусной кислоты, аммиака, такого как бутиловый или амиловый спирт и метиловый или этиловый спирт, насыщенный водный раствор фенола, крезола. Для различных смесей растворителей Rf это создает наилучшие условия для разделения. В соответствии с методикой практики различают следующие виды бумажной хроматографии: одномерные, двумерные, круговые и электрофорез.

Для получения двумерной хроматограммы хроматографию проводят дважды в противоположных направлениях. После обработки образца одним растворителем поверните хроматограмму на 90 ° и выполните второй хроматограф с другим растворителем. Этот метод позволяет более тонкое разделение компонентов смеси. Сочетание хроматографии и электрофореза, то есть получения электрофоретической хроматограммы на бумаге, оказалось очень эффективным.

Влияние электрического поля может быть использовано либо одновременно с хроматографией, либо последовательно, т.е. сначала электрофорез, затем хроматография. Качественный состав методов распределительной хроматографии на бумаге и образцов ТСХ может быть определен по конкретному цвету отдельных пятен на хроматограмме или по значению Rf каждого компонента.

Количественные измерения распределения и тонкослойной хроматографии выполняются по хроматографическим свойствам (окрашенная хроматограмма площадь и интенсивность его цвета) или методом промывки.

Во многих случаях хроматограмма разрезается на отдельные части в зависимости от количества пятен, каждое пятно обрабатывается соответствующим экстрагентом, а количество извлеченного материала определяется соответствующими методами, такими как фотометрия, полярография и т. Д. , Методики, основанные на использовании хроматографических свойств, очень разнообразны.

Количество вещества может быть определено методом шкалы, если одна и та же хроматограмма дает пятно раствора неизвестной концентрации и несколько стандартных пятен. Концентрацию тестируемого раствора можно определить, непосредственно сравнивая площадь пятна тестируемого раствора со стандартным раствором и интенсивность цвета.

Более точным является использование градуировочного графика S-logc. Где 5 — площадь пятна, а s — концентрация. В указанных координатах график является линейным. Измерение интенсивности плашечного цвета, пропорционального плотности, также используется. Методы жидкостной хроматографии с разделением добились успеха в анализе смесей катионов, смесей аминокислот и других органических кислот и смесей красителей в неорганическом качественном анализе.

Смотрите также:

Решение задач по аналитической химии

Жидкостно-жидкостная распределительная хроматография	Гель-хроматография
Колоночный вариант	Ионообменная хроматография